小鼠卵巢类器官培养基

产品介绍

小鼠卵巢类器官培养基为针对小鼠卵巢类器官培养需求优化的专用培养基，适用于相应小鼠组织来源类器官的原代建立、传代扩增和维持培养。可用于小鼠正常组织类器官模型构建、扩增、长期维持及相关科研实验。使用时应结合样本状态、基质体系、接种密度和培养终点对操作条件进行确认。

产品信息

操作说明 · 原代培养

1. 样本要求：建议使用新鲜获取或置于适用组织样本保存液中低温保存、运输的目标组织样本。采集、运输与处理全过程应遵循样本合规及生物安全要求，并尽快处理；如需延后，应按样本保存液说明书控制温度和时间。
2. 样本评估：在显微镜下观察样本状态，记录组织完整性、坏死或污染风险、细胞脱落情况及处理时间。
3. 样本清洗：在无菌条件下以适用组织清洗液充分漂洗样本，去除血液、黏液和碎屑；根据样本状态重复清洗。转移细胞悬液或类器官时，可先用润洗液预润洗枪头或移液管，以减少黏附损耗。
4. 组织剪碎与消化：将清洗后的组织剪成约 1 mm³ 小块，加入适量组织消化液，于 37℃条件下消化。每隔约 10 min 轻柔混匀并在显微镜下观察，具体时间应根据组织类型、纤维化程度和细胞释放情况调整，避免过度消化。
5. 终止与收集：当出现足量细胞团且多数组织块已被处理时，加入适用消化终止液终止反应。经适当过滤或静置分离后，于 4℃、约 300 ×g 离心 5 min，弃上清并收集细胞或细胞团。必要时按实验室 SOP 进行红细胞裂解。
6. 三维接种：提前预热培养板并准备冰上操作条件。用适量类器官培养水凝胶或经验证的基质重悬细胞团，按实验室 SOP 接种为稳定胶滴；待基质凝固后缓慢加入预温的小鼠卵巢类器官培养基。
7. 培养与换液：置于 37℃、5% CO₂ 培养箱培养，每日观察并记录形态、污染情况和生长状态。通常每 2–3 天更换一次培养基；具体频率可根据培养密度、培养基颜色和模型状态调整。

操作说明 · 传代培养

1. 收集：吸去培养基，加入润洗液或适用清洗液，轻柔回收类器官—基质混合物，置于离心管中，于 4℃、约 300 ×g 离心 5 min。
2. 解离：弃上清，加入适量类器官消化液轻柔吹打，于 37℃短时消化，并持续观察。当大部分类器官解离为适于再接种的细胞团时，立即加入清洗液或终止液停止消化。
3. 重悬与接种：离心收集细胞团，以适量三维培养基质重悬并接种。接种密度、细胞团大小和分瓶比例应依据模型生长状态及经验证的内部 SOP 确定。
4. 补液与培养：待基质凝固后加入预温的小鼠卵巢类器官培养基，置于 37℃、5% CO₂ 培养箱继续培养，并按观察结果定期换液。

注意事项

1. 本产品仅适用于小鼠卵巢相关类器官科研培养，不得用于人体或动物的诊断、治疗或直接临床用途。
2. 全程采用无菌操作；启封前若出现异常浑浊、泄漏、包装破损或其他异常，请停止使用并联系技术支持。
3. 避免培养基长时间处于非推荐温度、反复冻融或不同批次关键组分混用；分装与复温方式以标签或随货资料为准。
4. 培养结果受样本质量、运输时间、组织处理、基质批次、接种密度、培养环境和操作经验影响。首次使用建议设置小规模预实验及适当对照。
5. 涉及人源或动物源样本时，应遵守机构伦理、生物安全及废弃物处理规定。